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酶法制备牛骨蛋白胨的生产工艺流程

时间:2021-11-23 16:09:11 点击:476次

    牛骨蛋白胨是以牛骨为原料,经过酶法发酵分解制备而成的蛋白胨。但是牛骨在酶法分解过程中的技术很难掌握。今天着重介绍一下牛骨蛋白胨酶法分解制备的关键性技术。以牛骨膏为原料制备的蛋白胨,是一种优质的微生物培养基组分,可为微生物生长、发育、繁衍提供良好的氮源。通过多酶复合处理,研究牛骨蛋白胨的生产工艺,这不但可为禽畜骨的综合利用提供参考,也为牛骨蛋白胨在抗菌素、发酵和生化等行业的广泛应用奠定了基础,具有重要的社会和经济意义。


    材料


    牛骨膏:市售,其主要参数:水分18.6%,灰分1.21%,氨基氮0.18%,总氮22.4%。实验酶、硅藻土、氢氧化钠和盐酸。


    仪器设备


    KDN一08D定氮仪、PHS一3CpH计、SD一1500实验型喷雾干燥机


    实验方法


    1·单酶水解实验取5份609牛骨膏,加水至料液比1:2.5,于90℃条件下预热20min后冷却,分别加入胰酶、AS.1398中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、IMP酶、2709碱性蛋白酶进行酶解,各酶作用条件为其最适pH值和最适温度,反应中间断调整pH为最适值。各酶加入量为4000林/g牛骨膏,2次均分加入,间隔2h,总酶解时间4h。反应完后往酶解液中加入1.0%硅藻土,过滤后浓缩至30%,经喷雾干燥(进风180℃,出风90℃,进料速度600mL/h)制得产品。实验中改变酶的加入量和料液比,进一步探讨了胰酶对牛骨膏的水解特性。


    2·复合酶解实验单酶实验中,胰酶对牛骨膏表现了良好的水解性能,因此将胰酶分别与AS1398中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、IMP酶和2709碱性蛋白酶复配作用,拟进一步提高对牛骨膏的水解程度。试验中首先采用胰酶(3000U/g)作用2h,实验条件如前所述,之后再引入其他酶(1000U/g)处理2h,各酶都在最适pH值和最适温度条件下催化牛骨膏降解,酶解液的过滤、浓缩和干燥处理与单酶水解实验一致。在总加入酶量(400U/g牛骨膏)不变的条件下,试验中探讨了不同比例胰酶/木瓜蛋白酶复配对牛骨膏的酶解效果。


    3·测定方法水分含量测定:105℃恒重法L;I]灰分含量测定:总氮含量测定:凯氏定氮法伙氨基氮含量测定:甲醛滴定法伙酶活测定:采用oFhn一酚试剂法队实验中采用胰酶、AS.1398中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、IMP酶和2709碱性蛋白酶分别处理牛骨膏,由于酶的催化专一区别,各测试酶对牛骨膏表现了不同的水解活性,其中胰酶水解能力最强,经4h酶解后产品的氨基氮达2.78%。木瓜蛋白酶水解能力相对较低,其作用后产品氨基氮为2.39%。AS.1398中性蛋白酶、IMP酶和2709碱性蛋白酶作用后产品的氨基氮含量维持在一个较低的水平,分别为1.84%、1.4%和1.76%。实验中进一步研究了胰酶用量和底物浓度等因素对酶解效果的影响。

牛骨蛋白胨

    牛骨膏经胰酶和木瓜蛋白酶复合酶解可生产高质量的牛骨蛋白陈。原料(料液比1:2.5)在90℃预处理20min后冷却,加入胰酶(3000U/g牛骨膏),在50℃和pH8.0条件下酶解2h。调整料液pH值至6.5,加入木瓜蛋白酶(1000L1/})在60℃继续酶解2h,酶解液经硅藻土过滤和喷雾干燥后得产品(水分4.40l%、灰分3.20%,氨基氮3.240%,总氮15.10%)。本研究结果有利于高品质牛骨蛋白胨研发与应用。


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